Openfield 的行為觀察
一. 通常觀察嚙齒類動物在0F中的如下行為:
1-探究行為(explore) 包括用鼻子嗅聞空氣和曠場地板氣味等運(yùn)動行為。該運(yùn)動通常
表現(xiàn)為彎曲的運(yùn)動路線,運(yùn)動速度很慢.而且動物身體腹部常緊貼著曠場地板。
2-走動行為(walk) 常表現(xiàn)為較直的運(yùn)動路線和相對較快的活動速度,且不用鼻子嗅
聞空氣和曠場地板氣味等運(yùn)動行為。
3.旋轉(zhuǎn)行為(spinturn) 包括追逐自己尾巴而形成的固定模式的環(huán)繞運(yùn)動。
4·自我梳理行為(selfgroom) 快速清潔面部、前足和身體的行為。典型的完全的梳理
過程通常開始于動物輕輕地搔抓面部。動作逐漸增多并沿著身體向下.終止于尾尖。不論完
全梳理和非完全梳理過程(常在梳理身體時中斷)均應(yīng)被計人“梳理”過程。
5·坐(sit) 睜著眼睛而嗅聞空氣的非運(yùn)動狀態(tài)。定義“坐”的*小非運(yùn)動時間應(yīng)為3s。
6.睡眠(sleep) 眼睛緊閉且完全不運(yùn)動狀態(tài)。
7·伸展注意行為(stretchattend) 動物伸展身體,特別是從比較**之處(如曠場角落)
向著相對較不**之處(曠場中央部分)伸展身體.是動物對危險的評價行為。動物腹部保持
平坦緊貼曠場底部,并用鼻子嗅聞空氣和地板氣味。當(dāng)頭部和前足向前伸展時,后足保持不
動一該行為往往結(jié)束于前足“后退一步”,從而使身體不再伸展。當(dāng)進(jìn)行一系列伸展注意行為
時或者伸展注意行為之后進(jìn)行運(yùn)動活動則“后退一步”行為就不完整:在此情況下,應(yīng)對任何
一次身體完全伸展記數(shù)為。伸展注意”行為.
8·返回行為(return) 當(dāng)進(jìn)行非常慢的探索行為時,動物經(jīng)常返回到起點(diǎn)。在整個過程
中動物腹部緊貼曠場底部保持平坦.
9·后腿站立(rear)動物站立.雙前足離開地板:沿曠場側(cè)壁站立時.動物常靠在曠場
側(cè)壁上。
10.gt6(jump)所有四足全部離開曠場地板。
通常研究的指標(biāo)還包括累積運(yùn)動(locomotion)包括探究和走動。對于運(yùn)動、走動、探索.旋轉(zhuǎn)、坐、梳理和睡眠等行為.既要記錄行為的發(fā)生頻率(frequency),也要記錄行為的持續(xù)時間(duration),通常記錄5min測試時間內(nèi)的發(fā)生頻率和總持續(xù)時間;對于伸展注意、返回行為、后腿站立和跳動則僅記錄5rain內(nèi)的發(fā)生率一同時,還應(yīng)記錄從動物放入OF的一刻起.到所發(fā)生任何一個行為的潛伏期.OF通常分為5個部分(圖30一1),按照發(fā)生每個行為時所處的位置對每個行為進(jìn)行打分:
①四角之一(總面積的8.16%):
②四壁之一(40.82%);
③外環(huán)(32.65%):
④內(nèi)環(huán)(16.33%);
⑤中央(2.04%)。
當(dāng)動物四足全部進(jìn)入圖中某個領(lǐng)域時方可認(rèn)為動物已經(jīng)進(jìn)入該領(lǐng)域。由于伸展注意行為是一個“定向性”的行為,所以不以動作發(fā)生時的位置評分,而以動作所指的區(qū)域(如伸展注意外環(huán)就是指伸展姿勢由曠場側(cè)壁指向外環(huán))。另外,動物在曠場角落和沿側(cè)壁的時間總和記作趨觸性總分。
動物從放入OF的一刻起的各種潛伏期也可用于評估,如離開角落潛伏期、離開側(cè)壁潛伏期、進(jìn)入內(nèi)環(huán)潛伏期、進(jìn)入中央潛伏期、后腿站立潛伏期、位于中央時后腿站立潛伏期、沿側(cè)壁后腿站立潛伏期、非趨觸性位置后腿站立潛伏期、自我梳理潛伏期、返回行為潛伏期、走動潛伏期、伸展注意潛伏期或伸展注意不同曠場部位的潛伏期等。
動物接受不同劑量電離輻射作用后,通過檢測動物在曠場中各種行為指標(biāo)的變化反映電離輻射對動物行為的作用規(guī)律。
二、器材
動物行為測量和分析自動化系統(tǒng).包括】.0m×1.0m大小的曠場箱、變焦攝像頭、圖像采集卡、計算機(jī)、行為測量和分析自動化軟件;5%醋酸,
三、方法和步驟
實(shí)驗(yàn)時,曠場上方的攝像機(jī)采集動物在曠場中的行為表現(xiàn),通過圖像采集卡傳人計算機(jī)記錄、存儲并分析。具體過程如下:
(--)輻射動物
成年雄性SD大鼠60只,隨機(jī)分為4組,分別受到0、8、20、25Gy的1射線照射,以制備假輻射(OGy)、中度骨髓型放射病(8Gy)、腸型放射病(20Gy)和腦型放射病(25Gv)等動物模型。分別于照后即刻、24h、48h對各組動物進(jìn)行分組測量,每個時問點(diǎn)測量每組動物5只,每只動物僅測量一次。不重復(fù)檢測。
(二)曠場測量
1.調(diào)整曠場位置,使之位于攝像頭正下方;
2.調(diào)整實(shí)驗(yàn)室內(nèi)光線,使之形成漫反射光.而且曠場內(nèi)部沒有較大的反光斑:
3.用5%的醋酸一水溶液清洗曠場,使之不殘留其余異味.以后每只動物檢測之后均需用5%的醋酸一水溶液清洗曠場,以免動物之間通過氣味傳遞信息;
4.將動物分別從同一起步點(diǎn)放入曠場箱,進(jìn)入曠場箱后隨其自由活動,同時開啟行為記錄和分析自動化系統(tǒng)程序,通過計算機(jī)記錄動物活動情況;
5.每只動物測量5min,測試每只大鼠后.對每只動物的排便情況進(jìn)行記錄和清理,并用5%醋酸徹底清潔實(shí)驗(yàn)箱;